lunes, 30 de abril de 2012


INFLUENCIA DE LA FUENTE DE CARBONO EN EL CRECIMIENTO BACTERIANO


Objetivo 

En esta experiencia se pretendió determinar si las células de Desulfovibrio sp. son capaces 
de crecer empleando otras fuentes de carbono distintas de lactato. Este objetivo es importante ya que, al analizar la posibilidad de  utilizar un método biológico en el tratamiento de efluentes o residuos industriales, una variable que debe considerarse es la fuente de carbono a emplear. 
Resulta esencial que la misma otorgue un buen crecimiento, tenga fácil disponibilidad y sea económica. 

Materiales y métodos 

Para la realización de esta experiencia se  preparó medio de cultivo Potsgate C sin el 
agregado de lactato. Dicho medio fue fraccionado en 4 partes iguales a cada una de las cuales se les adicionó una fuente de carbono distinta en cantidades equimolares. Las fuentes de carbono utilizadas fueron: lactato, etanol, glucosa y acetato de sodio. 
Cada uno de los medios de cultivos se utilizó para llenar frascos de 100 ml (se realizaron 
duplicados para cada fuente de carbono). A  cada frasco se le hizo burbujear N2 y se le añadió solución para anaerobiosis. Una vez realizado esto se procedió a inocular los frascos al 15 % v/v. 
Los frascos fueron tapados con tapón de goma y virola metálica. Se tomó la primera muestra en forma inmediata. Los cultivos se incubaron a 30ºC y se tomaron muestras cada 48 - 72 hs. En cada una de las muestras se realizaron conteos directos al microscopio (ver sección 2.3) y se determinó la concentración de sulfato.

CARACTERISTICAS DE LAS BACTERIAS SULFATO REDUCTORAS


La producción biológica de sulfuro de hidrógeno en ambientes acuáticos se conoce desde el siglo pasado. Las bacterias sulfato reductoras (BRS) forman un grupo especializado de procariotes que tienen la capacidad de usar sulfato como aceptor final de electrones en la respiración (Mudryk y col., 2000). 
Características relevantes de estas bacterias: 
Fisiológicamente se pueden dividir en tres grupos celulares básicos: 
9 Eubacterias gram negativas 
9 Eubacterias gram positivas  
9 Arqueobacterias 
Estas bacterias llevan a cabo el proceso de reducción desasimilatoria de sulfato (es decir, 
cuando el sulfuro producido en la reducción del sulfato no es incorporado a la biomasa); este ion es utilizado como un oxidante para la degradación de la fuente orgánica de carbono (Postgate, 1954). En forma general, este proceso puede representarse mediante la siguiente ecuación química: 
2CH2O + SO4 Æ 2HCO3 -+ H2S 
Las características morfológicas de estas células varían considerablemente. Se han 
descrito distintos tipos celulares, entre los que se encuentran: bacilos, vibrios, cocos, espirilos, etc. (Widdel y Bak, 1992). 
 Las capacidades oxidativas y metabólicas de las BSR varían de acuerdo al género. Entre 
los compuestos orgánicos más utilizados se encuentran: lactato, acetato, piruvato, etanol, 
propanol y glucosa (Gibson, 1990). Los medios más utilizados para el crecimiento de BSR son los diseñados por J.R. Postgate (denominados medios B y C de Postgate) que poseen lactato como fuente de carbono. Además, el medio B contiene ácido abscórbico y tioglicólico como agentes reductores. Las composiciones detalladas de estos medios de cultivo serán descriptas en el siguiente capítulo. 
 Las bacterias sulfato-reductoras son estrictamente anaerobias y por lo general, son muy 
sensibles a los medios óxicos, muriendo de forma más o menos rápida cuando son expuestas a ese tipo de medios (Barton y Tomei, 1995).