INFLUENCIA DE LA FUENTE DE CARBONO EN EL CRECIMIENTO BACTERIANO

Objetivo 

En esta experiencia se pretendió determinar si las células de Desulfovibrio sp. son capaces 

de crecer empleando otras fuentes de carbono distintas de lactato. Este objetivo es importante ya que, al analizar la posibilidad de  utilizar un método biológico en el tratamiento de efluentes o residuos industriales, una variable que debe considerarse es la fuente de carbono a emplear. 

Resulta esencial que la misma otorgue un buen crecimiento, tenga fácil disponibilidad y sea económica. 

Materiales y métodos 

Para la realización de esta experiencia se  preparó medio de cultivo Potsgate C sin el 

agregado de lactato. Dicho medio fue fraccionado en 4 partes iguales a cada una de las cuales se les adicionó una fuente de carbono distinta en cantidades equimolares. Las fuentes de carbono utilizadas fueron: lactato, etanol, glucosa y acetato de sodio. 

Cada uno de los medios de cultivos se utilizó para llenar frascos de 100 ml (se realizaron 

duplicados para cada fuente de carbono). A  cada frasco se le hizo burbujear N2 y se le añadió solución para anaerobiosis. Una vez realizado esto se procedió a inocular los frascos al 15 % v/v. 

Los frascos fueron tapados con tapón de goma y virola metálica. Se tomó la primera muestra en forma inmediata. Los cultivos se incubaron a 30ºC y se tomaron muestras cada 48 - 72 hs. En cada una de las muestras se realizaron conteos directos al microscopio (ver sección 2.3) y se determinó la concentración de sulfato.

CARACTERISTICAS DE LAS BACTERIAS SULFATO REDUCTORAS

La producción biológica de sulfuro de hidrógeno en ambientes acuáticos se conoce desde el siglo pasado. Las bacterias sulfato reductoras (BRS) forman un grupo especializado de procariotes que tienen la capacidad de usar sulfato como aceptor final de electrones en la respiración (Mudryk y col., 2000). 

Características relevantes de estas bacterias: 

Fisiológicamente se pueden dividir en tres grupos celulares básicos: 

9 Eubacterias gram negativas 

9 Eubacterias gram positivas  

9 Arqueobacterias 

Estas bacterias llevan a cabo el proceso de reducción desasimilatoria de sulfato (es decir, 

cuando el sulfuro producido en la reducción del sulfato no es incorporado a la biomasa); este ion es utilizado como un oxidante para la degradación de la fuente orgánica de carbono (Postgate, 1954). En forma general, este proceso puede representarse mediante la siguiente ecuación química: 

2CH2O + SO4 = Æ 2HCO3 -+ H2S 

Las características morfológicas de estas células varían considerablemente. Se han 

descrito distintos tipos celulares, entre los que se encuentran: bacilos, vibrios, cocos, espirilos, etc. (Widdel y Bak, 1992). 

 Las capacidades oxidativas y metabólicas de las BSR varían de acuerdo al género. Entre 

los compuestos orgánicos más utilizados se encuentran: lactato, acetato, piruvato, etanol, 

propanol y glucosa (Gibson, 1990). Los medios más utilizados para el crecimiento de BSR son los diseñados por J.R. Postgate (denominados medios B y C de Postgate) que poseen lactato como fuente de carbono. Además, el medio B contiene ácido abscórbico y tioglicólico como agentes reductores. Las composiciones detalladas de estos medios de cultivo serán descriptas en el siguiente capítulo. 

 Las bacterias sulfato-reductoras son estrictamente anaerobias y por lo general, son muy 

sensibles a los medios óxicos, muriendo de forma más o menos rápida cuando son expuestas a ese tipo de medios (Barton y Tomei, 1995).  

BACTERIAS SULFATO REDUCTORAS

Las bacterias reductoras de sulfato comprenden varios grupos de bacterias que utilizan el sulfato como agente oxidante, reduciéndolo a sulfuro. La mayoría pueden también utilizar compuestos de azufre oxidados tales como sulfito y tiosulfato o azufre elemental. Es un metabolismo disimilativo de azufre puesto que no se asimila ningún compuesto orgánico. Las bacterias reductoras de sulfato se han considerado como un posible tratamiento para las aguas ácidas de las minas que otras bacterias originan.

Las bacterias reductoras de sulfato se tratan como un grupo fenotípico junto con otras bacterias reductoras de azufre para propósitos identificativos. Se encuentran en varias líneas filogenéticas, tres de las cuales se incluyen en Proteobacteria, todas en el subgrupo del delta:

• Desulfobacterales
• Desulfovibrionales
• Syntrophobacterales

Un cuarto grupo incluye termófilos en su propio filo, Thermodesulfobacteria. Las bascterias reductoras de sulfato restantes se clasifican con otras bacterias en Nitrospirae y en el grupogram positivo Peptococcaceae (por ejemplo, Thermodesulfovibrio y Desulfotomaculum, respectivamente). Hay también un único género de Archaea capaz de la reducción del sulfato,Archaeoglobus.

El olor a huevos podridos del sulfuro de hidrógeno es a menudo un marcador para la presencia de bacterias reductoras de sulfato en la naturaleza.

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